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          二氧化碳培養(yǎng)箱無污染控制技術

          發(fā)布時間: 2010-06-24  點擊次數(shù): 1372次

           二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對濕度(95%),來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。 廣泛應用于細胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),常見于細胞動力學研究、哺乳動物細胞分泌物的收集、各種物理、化學因素的致癌或毒理效應、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細胞、組織工程、藥物篩選等研究領域。 
                在生物活體內(nèi),生物體有自身的免疫系統(tǒng)保護細胞或組織,但是在體外培養(yǎng)時,沒有任何保護自己的免疫屏障。對于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數(shù)溫度、CO2 和濕度,大多數(shù)培養(yǎng)箱都能滿足研究實驗的需要。然而,針對培養(yǎng)過程中面臨的各種污染源,各品牌二氧培養(yǎng)箱的控制方式和效果不盡相同,因此細胞體外培養(yǎng)中zui大的威脅實際上是污染問題。 
               二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源:細菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原體、非同種細胞。 
               對于細胞來說,非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,培養(yǎng)箱本身是不會辨別的,而細胞培養(yǎng)中大部分時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關鍵! 
               細菌:細菌污染后,培養(yǎng)基1-2天就會變色,對細胞生長影響明顯,應迅速將污染細胞與其它細胞系隔離,滅菌后丟棄,還要用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺。 
                病毒:由于病毒寄生生存,爆發(fā)后盡快和正常細胞隔離,丟棄處理,相對來說容易處理,對操作者威脅較大;盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
               真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了;目前沒有好的抑制方法,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,一旦污染容易反復爆發(fā),尤其孢子很難殺滅。 
               支原體:支原體污染后,因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,細胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,實則細胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,如引起細胞變形,影響DNA合成,抑制細胞生長等,往往被大多數(shù)實驗者忽視。 
              非同種細胞:即細胞交叉污染,由于細胞培養(yǎng)操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,往往會使一種細胞被另一種細胞污染。目前,世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染,致使許多實驗宣告無效。
          因此,以上污染一旦發(fā)生,細胞zui后基本只能丟棄,實驗無法挽救,對于許多取樣困難的實驗損失無法估量! 

              目前,二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術主要有干熱、濕熱、紫外燈照射、消毒劑擦拭等。 
              高溫干熱空氣滅菌是目前*的zui有效的滅菌技術,能*消滅所有微生物污染源(包括耐高溫的芽孢桿菌);濕熱滅菌通常用于高壓蒸汽滅菌中,比較少用在CO2培養(yǎng)箱上,濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法,煮沸的水溫一般至少需為100℃,細菌繁殖體煮沸5分鐘被殺死,但芽胞常需煮沸2小時以上才可被殺死;紫外燈照射法的有效性受很多因素影響,如遮擋、時間、強度、照射距離,濕度等,滅菌效果很難保證;消毒劑擦拭法是對表面滅菌的方法,適合于平整的表面如實驗臺面,而箱體內(nèi)部設計的死角、各種器件因無法擦拭等因素導致滅菌效果也很有限,而且含氯、碘的消毒劑對于不銹鋼有腐蝕作用,不能對不銹鋼箱體進行擦拭滅菌。 
           
                英國LEEC TOUCH 190S CO2培養(yǎng)箱是高品質(zhì)培養(yǎng)箱的代表之作,其中在無污染控制方面,它采用高達200℃的高溫干熱空氣滅菌技術,而且整個滅菌過程僅需7個小時,相比較其它品牌的多達十幾個小時的滅菌過程,LEEC在保證*消滅所有微生物污染源的同時,也為客戶節(jié)省大量寶貴的實驗時間,越來越受到客戶的青睞。 
                 在箱體的設計上,英國LEEC TOUCH190S CO2培養(yǎng)箱也從多方面進行了抑菌設計:(1)外體采用不銹鋼材質(zhì),外加抗菌涂層;(2)內(nèi)壁采用拋光不銹鋼材質(zhì),研究顯示拋光不銹鋼能夠明顯降低污染物的生長; (3)單片成型內(nèi)腔,無焊接,沒有縫隙,*;(4)HEPA空氣過濾器設計,能夠有效的過濾掉進氣潛在的污染源和顆粒雜質(zhì);(5)無風扇循環(huán),空氣只靠自然對流運動,沒有裝配通風管道等不易拆除不易清潔的零部件,使清潔工作更為簡便,消除了導致細胞培養(yǎng)交叉污染的一大源頭。
           
                因此,英國LEEC TOUCH 190S CO2培養(yǎng)箱不但能為細胞生長提供的體外模擬環(huán)境,更讓您的細胞培養(yǎng)全程安全無憂,是細胞培養(yǎng)箱的未來發(fā)展方向!  

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