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ATCC是美國(guó)細(xì)胞庫,擁有超過30,000種細(xì)胞株,是生命科學(xué)研究的重要資源。ATCC常用細(xì)胞株鑒定是指對(duì)ATCC細(xì)胞株進(jìn)行鑒定,以確保其純度、認(rèn)證和可重復(fù)性。
ATCC常用細(xì)胞株鑒定的目的是為了保證ATCC細(xì)胞株的質(zhì)量和可靠性。ATCC細(xì)胞株鑒定包括細(xì)胞形態(tài)學(xué)、生長(zhǎng)特性、細(xì)胞表型、基因型等方面的檢測(cè)。這些檢測(cè)可以幫助研究人員確定細(xì)胞株的身份、純度和穩(wěn)定性,從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性。
ATCC細(xì)胞復(fù)蘇程序:
1、準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng)容器(如T-75細(xì)瓶),加入至少10ml適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,并平衡溫度及pH。
2、從液氮罐中取出凍存管,并在37℃(或適合該細(xì)胞的溫度)水浴中緩慢搖動(dòng)至冰晶融化(約2min),注意解凍過程要迅速。
3、從水浴中取出凍存管,浸泡或者噴撒酒精消毒、后續(xù)的操作,需在無菌操作臺(tái)中,并保證嚴(yán)格無菌。
4、擰開凍存管蓋,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含有9ml培養(yǎng)基的無菌離心管中。溫和離心(125g×10min),棄去上清去除凍存保護(hù)劑。注意不要擾動(dòng)細(xì)胞層。加入1-2ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,緩慢吹打使細(xì)胞團(tuán)變松散。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含培養(yǎng)基的容器中充分混合,
5、24小時(shí)后,檢測(cè)細(xì)胞狀態(tài)。
注:細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),應(yīng)迅速融化凍存的細(xì)胞溶液,然后迅速與培養(yǎng)基混合,并接種到合適的細(xì)胞瓶中。
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